為什么要進行進行細胞系STR鑒定

據(jù)統(tǒng)計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識，只因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復、臨床細胞治療災(zāi)難性后果……，這將浪費大量時間、精力和金錢。世人皆知，細胞身嬌體貴難養(yǎng)活，養(yǎng)好細胞實屬不易。而這其中煩的是污染、怕的是掉包。因為盡管研究僧們有方法把一切污染的源頭扼殺在搖籃之內(nèi)，卻沒有火眼金睛辨別已經(jīng)換了馬甲的錯誤細胞。因而細胞一旦被李代桃僵，再資深的科研者都會陰溝里翻船，所以細胞鑒定顯得尤為重要。為什么要進行細胞系鑒定？進行細胞系STR鑒定是很重要的。...

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使用ipsc誘導多能干細胞生成類器官技術(shù)簡介

類器官是復雜的3-D器官樣微組織，由多種分化的細胞類型組成，其結(jié)構(gòu)組織類似于體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的細胞，具有中央腔和其他類似體內(nèi)的結(jié)構(gòu)特征。從ipsc誘導多能干細胞產(chǎn)生的類器官已被描述用于胃、腸、肺、大腦、腎、肝臟等各種組織，這些類器官是其他體外模型的有吸引力的替代品；這些微組織比2-D細胞培養(yǎng)或簡單的3-D球體聚集體更好地概括了體內(nèi)組織表型，但沒有與器官外植體或組織切片相關(guān)的挑戰(zhàn)，例如培養(yǎng)壽命有限。事實上，類器官保留了許多細胞培養(yǎng)的典型有利特征，例如維持穩(wěn)定培養(yǎng)數(shù)月的能力，以及冷凍保存...

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單層細胞系傳代培養(yǎng)指南

大多數(shù)細胞系和原代細胞培養(yǎng)物生長為單一厚度的細胞層（單層）或附著在玻璃或經(jīng)過特殊處理的塑料基質(zhì)上的薄片。為了保持培養(yǎng)物的健康和積極生長，通常需要定期對它們進行傳代培養(yǎng)。常見的傳代培養(yǎng)方法涉及通過使用蛋白水解酶（如胰蛋白酶或膠原酶）破壞細胞間和細胞與基質(zhì)的連接。在細胞解離成主要由單細胞組成的懸浮液后，將它們稀釋并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)容器中。在那里它們可以重新附著并開始生長和分裂，經(jīng)過一段時間的孵化后再次接近匯合。此時，它們可以再次進行傳代培養(yǎng)或用于實驗。以下指南描述了典型單層細胞培養(yǎng)...

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hTERT-成纖維細胞培養(yǎng)解決方案

hTERT成纖維細胞為永生化子宮內(nèi)膜成纖維細胞(THESC)具有延長的壽命，并且在核型、形態(tài)和表型方面與原代親代細胞相似。在功能上，THESCs顯示激素治療后蛻膜化的生化終點。THESCs來源于從患有肌瘤的成年女性身上獲得的基質(zhì)細胞。原代基質(zhì)子宮內(nèi)膜細胞通過用來自包裝細胞系pA317-hTERT的上清液感染而永生化，該細胞系表達hTERT和嘌呤霉素抗性基因。hTERT成纖維細胞培養(yǎng)方案如下：一、所需材料Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM)/F12(Sigma,D2...

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CRISPR-Cas9基因編輯實驗中的注意事項

在細胞上做基因研究的一般的過程就是：利用CRISPR-Cas9先做基因除(GeneKnockout)，獲得基因敲除細胞系純合細胞：然后分析相關(guān)的生物學表型；最后做為對照還需要將原敲除的基因回補會到原細胞系中，做為對照細胞進行實驗對比。而利用Cas9進行細胞敲除之后，細胞回補實驗室要注意哪些問題?特別需要考慮的技術(shù)原理是那些？如何規(guī)劃好實驗流程，下面我們就一步步的進一下細胞其因敲除和回補實驗的效率/價格/周期等。一、敲除細胞的方式一般都是純合基因敲除細胞，當然也可以選擇MixC...

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