免疫熒光標記法

免疫熒光標記法1、細胞膜上的免疫熒光檢測法間接標記法1)制備單細胞懸液；2)細胞計數(shù)，取出1×106個細胞于試管中；3)用臺盼藍染色計活細胞數(shù)，要求活細胞數(shù)90～95%；4)在試管中加入一抗，（劑量按照說明書的要求），孵育30～60分鐘；5)PBS洗滌1～2次，1500rpm，離心3分鐘，棄上清；6)加入二抗，孵育20～30分鐘；7)PBS洗一次，1500rpm，離心3分鐘，棄上清;8)加300μlPBS，上機檢測(若不能及時上機檢測，可加1ml1%多聚甲醛固定，可放置1周)...

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細胞凋亡檢測及分子生物學檢測步驟

細胞凋亡檢測及分子生物學檢測步驟：1、細胞DNA含量分布（由細胞DNA降解方式檢測細胞凋亡）收集已固定的單細胞懸液約5×105~1×106/ml；離心除去固定液，3mlPBS重懸細胞;使用低速離心機1500rpm離心，5分鐘，棄去PBS；加PI染液1ml，室溫避光20分鐘；調整細胞濃度5×105/ml；上機檢測。2、磷脂酰絲氨酸外翻分析檢測細胞凋亡1)常規(guī)制備單細胞懸液,用PBS洗兩次.(若為全血要先溶血),取約5×106個細胞，1500rpm離心,棄上清,用400μl1×B...

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瓊脂糖核酸電泳介紹

瓊脂糖核酸電泳步驟1.用蒸餾水將制膠模具和梳子沖洗干凈，放在制膠平板上，封閉模具邊緣，架好梳子；2.根據(jù)欲分離DNA片段大小用凝膠緩沖液配制適宜濃度的瓊脂糖凝膠：準確稱量瓊脂糖干粉，加入到配膠用的三角燒瓶內，定量加入電泳緩沖液（一般20~30ml）；3.放入到微波爐內加熱熔化。冷卻片刻，加入一滴熒光染料，輕輕旋轉以充分混勻凝膠溶液，倒入電泳槽中，待其凝固；4.室溫下30~45分鐘后凝膠全凝結，小心拔出梳子，將凝膠安放在電泳槽內；5.向電泳槽中倒入電泳緩沖液，其量以沒過膠面1m...

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細胞培養(yǎng)板孔徑對細胞生長的影響

細胞培養(yǎng)是細胞生物學和分子生物學實驗中的重要環(huán)節(jié)。而細胞培養(yǎng)板是細胞培養(yǎng)中常用的容器，它的孔徑大小對于細胞的生長和實驗結果有一定的影響。本文將從細胞培養(yǎng)板孔徑大小對細胞生長、細胞通氣和細胞遷移的影響進行介紹。一、細胞培養(yǎng)板孔徑大小對細胞生長的影響細胞培養(yǎng)板的孔徑大小對細胞的生長是有影響的?？讖捷^小的細胞培養(yǎng)板通常具有較高的背景阻抗，對細胞形態(tài)和分子表達的影響較小，比如Tanswell細胞小室適合于長時間培養(yǎng)或實驗。而孔徑較大的細胞培養(yǎng)板則通常具有較低的背景阻抗，對細胞形態(tài)和分...

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淺談檢測葡萄糖乳酸的工具-EKF乳酸分析儀

乳酸是葡萄糖無氧代謝的產(chǎn)物，廣泛分布于人體的白色骨骼肌、腦、皮膚、腎臟髓質和紅細胞中。乳酸的產(chǎn)生主要通過葡萄糖糖酵解途徑，在細胞質中通過丙酮酸代謝產(chǎn)生。血液乳酸濃度被視為反映外周組織灌注情況和細胞內是否缺氧的敏感標志物，也是作為瀕亡預兆的指標。使用EKF乳酸分析儀通過對乳酸濃度的實時檢測，也可以及時發(fā)現(xiàn)并糾正變化。乳酸的動態(tài)變化與機體的內環(huán)境密切相關，因此動態(tài)檢測乳酸濃度對于醫(yī)生在搶救過程中及早發(fā)現(xiàn)疾病變化具有重要意義。通過檢測乳酸值，醫(yī)生能夠判斷細胞的損傷程度和組織的缺氧狀...

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